产品货号:
QN2053
中文名称:
磁珠法动物基因组DNA提取试剂盒(心、肝、肌)
英文名称:
Magnetic Animal Tissue Genomic DNA Kit
产品规格:
50T
发货周期:
1~3天
产品价格:
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本试剂盒采用具有独特分离作用的磁珠和缓冲液系统,可从样品中分离纯化高质量基因组DNA。特殊包被的磁珠在一定条件下对目的DNA具有很强的亲和力,而当条件改变时,磁珠释放吸附的 DNA,能够达到快速分离纯化 DNA 的目的。整个过程安全、便捷,提取的 DNA 纯度高。使用本试剂盒纯化的基因组 DNA 的 OD260/OD280 均在 1.7-1.9 之间,可以应用于各类下游分子生物学实验。
试剂盒组成:
储存条件:磁珠可以在室温下运输,但请在4℃冰箱中保存,禁止冻存。其余试剂可以室温保存,更长时间的保存可置于2-8℃。有效期1年。
操作步骤:
使用前请先在漂洗液中配置70%乙醇。若裂解液产生沉淀,使用前应将试剂盒内的溶液在室温放置一段时间,必要时可在 37℃水浴中预热 10min 溶解沉淀,摇匀后使用。
1.裂解
取适量的动物组织样本(肌肉组织≤50mg;心脏≤30mg;肝脏≤20mg)用液氮研磨成粉末,并迅速转移到已加入600μl裂解液S1-2、40μl裂解液S2的EP管中,吹打或震荡混合均匀。将EP管置于65℃水浴25~30min。待冷却到室温,加入400ul氯仿,剧烈震荡15s,静置3min,12000rpm 4℃离心5-10min。
2.结合
尽量取净上清于新的1.5mL EP管中,加入等体积的异丙醇以及振荡混匀的50μL磁珠,颠倒混匀1min,静置3min。将EP管置于磁铁上进行磁分离,吸弃废液(吸净管盖及管底残液)。
3.洗涤
加入600μL 漂洗液(使用前请预先配置70%乙醇),轻柔混匀1~2min,将EP管置于磁力架上进行磁分离,吸净管盖及管底的残液;重复本步骤一次。
4.洗脱
室温晾干5~10min至乙醇挥发完全,加入50~100μL洗脱液,缓慢抽吸混匀,65℃水浴10min(每隔1~2min轻摇EP管几下混匀)。将EP管置于磁力架上进行磁分离,小心吸取上清液至新的EP管中,进行下游实验。(判断磁珠晾干的标准:侧面观察磁珠无反光,正面观察磁珠边缘龟裂)
注意事项:
1.动物组织(心、肝、肌肉)要用液氮充分研磨。
2.整个裂解过程操作尽量温和,并在要求时间内完成。
3.如果组织液浓度较高,则建议磁珠量可适当增加,以获取高浓度DNA。
4.客户自备试剂:氯仿、异丙醇、无水乙醇。
5.使用前请在漂洗液瓶中预先配制 70%乙醇。
6.磁珠在使用前一定要充分混匀。
常见问题及参考意见:
1.得率低
(1)组织没有完全裂解完,裂解时间不够或没有离心直接进行下一步操作:可适当延长裂解时间,最长不超过60 min。样品裂解后,请一定要离心后再进行下一步操作。
(2)结合不充分:结合过程中要使磁珠一直处于悬浮状态,并且充分颠倒混匀。
(3)取样量大于说明书给出量:取样量请严格按照说明书操作。
2.条带弥散
(1)样品不新鲜或反复冻融多次:尽量用新鲜样品进行实验,如果样品需要保存,可根据实验,分装保存样品,尽量避免反复冻融;
(2)环境温度太高:可以将研钵置于-20℃预冷或置于液氮保存后再进行研磨,如果所提取材料基因组DNA极易降解,可用液氮研磨;
(3)裂解时间太长:裂解时间不要超过60 min;
(4)提取后模板DNA放置时间太长:提取后如有需要,请尽量及时进行凝胶电泳实验。短期内可置于4℃保存,长期请置于-20℃保存(尽量注意避免反复冻融)。
3.DNA液有颜色
(1)洗涤过程不充分:如果结合后磁珠呈团状、 丝状或颗粒状,可增加点阵力度及次数,充分吹打混匀。
(2)裂解不充分:适当增加裂解液S1-2和S2用量,也可以延长裂解时间。
(3)样品用量大于说明书给出量而其他试剂用量没有相应调整:严格按照说明书操作,如果需要增大样本量,可以等比例增加裂解液S1-2、S2以及磁珠用量,其他试剂用量不变。
4.DNA样品不纯,干扰后续实验
(1)DNA液有乙醇残留:洗涤时,请注意吸净管盖及管底的残液。此外,磁珠应完全干燥,保证无乙醇残留。
(2)磁珠洗涤不充分:加入70%乙醇溶液时,请吸打或点阵混匀。如有必要,可增加一次洗涤步骤。
(3)DNA液中吸入磁珠:如果不小心吸入磁珠,请将上清液返回原管,待磁珠完全吸附至管壁后重新吸取上清。或者将吸取的上清液10000 rpm离心2 min,再取上清。
(4)DNA液中含有蛋白质等杂质:建议适当减少样品用量。或可重复一次提取过程去除杂质。
(5)DNA液中含有轻微盐离子等杂质,此为洗脱液(含有抑制核酸降解的成分)正常现象,不影响下游实验。如有特殊需要,可使用等量的经高压灭菌的去离子水作为洗脱液。为方便实验,可将获得的DNA置于-20℃环境分装保存。
相关搜索:磁珠法动物基因组DNA提取试剂盒(心、肝、肌),Magnetic Animal Tissue Genomic DNA Kit
试剂盒组成:
组分 | DM1702-50T |
裂解液S1-2 | 33ml |
裂解液S2 | 2.2ml |
漂洗液 | 1(空瓶) |
洗脱液 | 5.5ml |
磁珠 | 1.4ml×2 |
说明书 | 1份 |
储存条件:磁珠可以在室温下运输,但请在4℃冰箱中保存,禁止冻存。其余试剂可以室温保存,更长时间的保存可置于2-8℃。有效期1年。
操作步骤:
使用前请先在漂洗液中配置70%乙醇。若裂解液产生沉淀,使用前应将试剂盒内的溶液在室温放置一段时间,必要时可在 37℃水浴中预热 10min 溶解沉淀,摇匀后使用。
1.裂解
取适量的动物组织样本(肌肉组织≤50mg;心脏≤30mg;肝脏≤20mg)用液氮研磨成粉末,并迅速转移到已加入600μl裂解液S1-2、40μl裂解液S2的EP管中,吹打或震荡混合均匀。将EP管置于65℃水浴25~30min。待冷却到室温,加入400ul氯仿,剧烈震荡15s,静置3min,12000rpm 4℃离心5-10min。
2.结合
尽量取净上清于新的1.5mL EP管中,加入等体积的异丙醇以及振荡混匀的50μL磁珠,颠倒混匀1min,静置3min。将EP管置于磁铁上进行磁分离,吸弃废液(吸净管盖及管底残液)。
3.洗涤
加入600μL 漂洗液(使用前请预先配置70%乙醇),轻柔混匀1~2min,将EP管置于磁力架上进行磁分离,吸净管盖及管底的残液;重复本步骤一次。
4.洗脱
室温晾干5~10min至乙醇挥发完全,加入50~100μL洗脱液,缓慢抽吸混匀,65℃水浴10min(每隔1~2min轻摇EP管几下混匀)。将EP管置于磁力架上进行磁分离,小心吸取上清液至新的EP管中,进行下游实验。(判断磁珠晾干的标准:侧面观察磁珠无反光,正面观察磁珠边缘龟裂)
注意事项:
1.动物组织(心、肝、肌肉)要用液氮充分研磨。
2.整个裂解过程操作尽量温和,并在要求时间内完成。
3.如果组织液浓度较高,则建议磁珠量可适当增加,以获取高浓度DNA。
4.客户自备试剂:氯仿、异丙醇、无水乙醇。
5.使用前请在漂洗液瓶中预先配制 70%乙醇。
6.磁珠在使用前一定要充分混匀。
常见问题及参考意见:
1.得率低
(1)组织没有完全裂解完,裂解时间不够或没有离心直接进行下一步操作:可适当延长裂解时间,最长不超过60 min。样品裂解后,请一定要离心后再进行下一步操作。
(2)结合不充分:结合过程中要使磁珠一直处于悬浮状态,并且充分颠倒混匀。
(3)取样量大于说明书给出量:取样量请严格按照说明书操作。
2.条带弥散
(1)样品不新鲜或反复冻融多次:尽量用新鲜样品进行实验,如果样品需要保存,可根据实验,分装保存样品,尽量避免反复冻融;
(2)环境温度太高:可以将研钵置于-20℃预冷或置于液氮保存后再进行研磨,如果所提取材料基因组DNA极易降解,可用液氮研磨;
(3)裂解时间太长:裂解时间不要超过60 min;
(4)提取后模板DNA放置时间太长:提取后如有需要,请尽量及时进行凝胶电泳实验。短期内可置于4℃保存,长期请置于-20℃保存(尽量注意避免反复冻融)。
3.DNA液有颜色
(1)洗涤过程不充分:如果结合后磁珠呈团状、 丝状或颗粒状,可增加点阵力度及次数,充分吹打混匀。
(2)裂解不充分:适当增加裂解液S1-2和S2用量,也可以延长裂解时间。
(3)样品用量大于说明书给出量而其他试剂用量没有相应调整:严格按照说明书操作,如果需要增大样本量,可以等比例增加裂解液S1-2、S2以及磁珠用量,其他试剂用量不变。
4.DNA样品不纯,干扰后续实验
(1)DNA液有乙醇残留:洗涤时,请注意吸净管盖及管底的残液。此外,磁珠应完全干燥,保证无乙醇残留。
(2)磁珠洗涤不充分:加入70%乙醇溶液时,请吸打或点阵混匀。如有必要,可增加一次洗涤步骤。
(3)DNA液中吸入磁珠:如果不小心吸入磁珠,请将上清液返回原管,待磁珠完全吸附至管壁后重新吸取上清。或者将吸取的上清液10000 rpm离心2 min,再取上清。
(4)DNA液中含有蛋白质等杂质:建议适当减少样品用量。或可重复一次提取过程去除杂质。
(5)DNA液中含有轻微盐离子等杂质,此为洗脱液(含有抑制核酸降解的成分)正常现象,不影响下游实验。如有特殊需要,可使用等量的经高压灭菌的去离子水作为洗脱液。为方便实验,可将获得的DNA置于-20℃环境分装保存。
相关搜索:磁珠法动物基因组DNA提取试剂盒(心、肝、肌),Magnetic Animal Tissue Genomic DNA Kit